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PCR檢測試劑盒
商品屬性
| 產品名稱 | 規格 | 貨號 |
|
單增李斯特菌prfA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法) |
50T |
YS-P014998 |
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光。
有效期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的有效期一般為1年，這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下，產物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性，有明顯的指數擴增期，Ct值應小于等于35；
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復核一次，若復核結果Ct<40且有指數擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現假陽性結果；
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，可能會導致出現假陰性結果。
PCR反應的特異性：
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
單增李斯特菌prfA基因熒光PCR檢測其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
