技術文獻
技術文獻
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒
人轉化生長因子β1(TGF-β1)elisa試劑盒
人轉化生長因子α(TGF-α)elisa試劑盒
人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa試劑盒
人干細胞因子受體(SCFR)elisa試劑盒
人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)elisa試劑盒
人可溶性CD40配體(sCD40L)elisa試劑盒
人可溶性CD30配體(sCD30L)elisa試劑盒
人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒
人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)elisa試劑盒
人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒
人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒
人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)elisa試劑盒
人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)elisa試劑盒
人的神經(jīng)生長因子(NGF)elisa試劑盒
人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa試劑盒
人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa試劑盒
人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa試劑盒
人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa試劑盒
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa試劑盒
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa試劑盒
人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)elisa試劑盒
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa試劑盒
人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa試劑盒
人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa試劑盒
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)elisa試劑盒
人白介素9(IL-9)elisa試劑盒
